Какие они — “идеальные” яйцеклетка и сперматозоид для ЭКО?

Які вони – “ідеальні” яйцеклітина й сперматозоїд для ЕКЗ?

Успіх методики ЕКЗ при лікуванні безпліддя залежить від багатьох факторів. І важливе значення тут має якість відібраних жіночих і чоловічих репродуктивних клітин.

Запис на консультацію
* обов'язкові для заповнення поля
Дякуємо ваше повідомлення надіслано

Адже що якісніший генетичний матеріал, то більше шансів отримати ембріони з високим імплантаційним потенціалом і витривалістю.

На певному етапі екстракорпорального запліднення перед ембріологом постає нелегке завдання: вибрати з мільйонів сперматозоїдів найактивнішого, з правильною морфологією та з’єднати його зі зрілою й придатною до запліднення яйцеклітиною.

Які ж вони – ідеальні містер і місіс Статеві Клітини для запліднення при ЕКЗ? Які методики й оцінки використовують лікарі для їх відбору? Про це розповімо в нашій статті.

Вивчення невдалих циклів ЕКЗ показало, що оцінка ооцитів (жіночих статевих клітин) у багатьох випадках передбачала результати ЕКЗ краще, ніж оцінка ембріона.

Які ж основні критерії оцінки якості яйцеклітин?

Як правило, найздоровіші яйцеклітини в жінок дозрівають у віці від 20 до 30 років. І вже після 35 років якість помітно погіршується. Стимуляція яєчників у протоколі ЕКЗ допомагає прискорити їх дозрівання, але не гарантує отримання зрілих і якісних ооцитів1.

Як визначити якість яйцеклітини?

Ембріолог проводить візуальну оцінку ооцитів за допомогою бінокулярного мікроскопа одразу після їх забору з яєчників жінки.

Кожна яйцеклітина оцінюється в комплексі найважливіших критеріїв2:

  • ооцит-кумулюсного комплексу;
  • прозорості оболонки;
  • структури цитоплазми;
  • перивітелінового шару;
  • морфології першого полярного тільця;
  • форми ооцита;
  • веретена поділу.

Хороша цитоплазма завжди однорідна, одного кольору й без гранул. Про низьку якість яйцеклітини свідчать наявні вакуолі, темний колір, гранули й деформації.

Перевірка якості яйцеклітини дає змогу відбракувати неякісні екземпляри й тим самим обрати найпридатніший для процедури ЕКЗ генетичний матеріал, який позначають абревіатурою MII2.

Журнал Assisted Reproduction and Genetics у своїй статті “Кількісний та морфологічний аналіз ооцитів, зібраних під час 438 циклів ЕКЗ” наводить факти на підтвердження того, що частота вагітностей підвищується зі збільшенням кількості взятих ооцитів3.

Перевірка якості чоловічих статевих клітин.

Функціональний аналіз.

Вимірює здатність одного сперматозоїда доставляти правильний набір хромосом у яйцеклітину. Для цього має продукуватися достатня кількість сперматозоїдів, вони повинні мати нормальну рухливість і форму, проходити через цервікальний слиз у матку. Дефекти будь-якого з цих складних процесів можуть призвести до чоловічого безпліддя5.

Які вони – “ідеальні” яйцеклітина й сперматозоїд для ЕКЗ?

Морфологія.

Фарбування мазка сім’яної рідини дає змогу кількісно оцінити нормальні й аномальні морфологічні форми сперматозоїдів в еякуляті. Мазки оцінюються по морфології з використанням класифікації Всесвітньої організації охорони здоров’я (ВООЗ) та критеріїв Крюгера6.

Метод ВООЗ класифікує сперміі аномальної форми на певні категорії з урахуванням аномалій голови, хвоста й середньої частини тіла, що ґрунтується на зовнішньому вигляді сперматозоїдів (> 30% нормальних форм)2.

Система аналізу морфології по Крюгеру дуже ретельна, тому під час підрахунку кількості сперміїв з нормальною морфологією враховують тільки клітини “ідеальної” форми. Усі інші клітини одразу класифікують як аномальні (> 14% нормальних форм)4.

При визначенні клінічних значень морфологія має використовуватися разом з іншими критеріями, а не як окремий параметр, оскільки загалом вагітність можлива з низькою оцінкою морфології при комбінації параметрів.

Рухливість.

Нормальний аналіз сперми повинен містити не менше 50% прогресивно рухливих сперматозоїдів. Якщо більше 50% сперматозоїдів не рухомі, їх слід перевірити на життєздатність. Стійка низька моторика часто призводить до невдачі запліднення7.

Тестування життєздатності сперматозоїдів.

Використовується для визначення того, чи живі нерухомі сперматозоїди. Аналіз проводять, коли рухливість сперматозоїдів становить менше 5-10%8.

При підтвердженні чоловічого безпліддя й порушенні розвитку вагітності перед процедурою ЕКЗ як додаткові методи обстеження ВООЗ рекомендує такі дослідження:

  • Фрагментацію ДНК сперматозоїда – виявлення розривів ланцюжків ДНК сперматозоїда або порушення його цілісності. Що нижче рівень цілісності генетичного матеріалу, то менше шансів настання вагітності9.
  • Оксидативний стрес сперматозоїдів. Коли в спермі є надлишок активних форм кисню, це може спровокувати патологічні зміни сперматозоїдів, викликаючи окисне пошкодження клітинних оболонок, білків і ДНК.
  • МАР-тест (Антиспермальні антитіла). Це клас складних білків (імуноглобуліни типів IgG, IgA або IgM), що обмежують швидкість і життєздатність гамет чоловіка. При їх виявленні стає зрозуміло, що організм сприймає спермії як “чужі” клітини й атакує їх.
  • НВА-тест – дає змогу проаналізувати здатність сперміїв зв’язуватися з гіалуронатом (складова клітинного оточення яйцеклітини), оцінивши при цьому їх зрілість, і перевірити на наявність аномалій.

Як бачимо, методів та оцінок чоловічої фертильності існує достатньо, але для кожного конкретного випадку доктор призначає індивідуальний перелік необхідних досліджень.

Отже, оцінка яйцеклітин і сперматозоїдів до проведення процедури ЕКЗ – це складний і клопіткий процес, при якому скрупульозна увага приділяється граничним значенням, морфології, зовнішньому вигляду та іншим критеріям. Але такі оцінки надають корисну клінічну інформацію для отримання високоякісних ембріонів і підвищують шанси на довгоочікувану вагітність.

Джерела

  1. Американське товариство репродуктивної медицини (ASRM). Лікарські препарати, що стимулюють овуляцію. 2016 р. – Режим доступу : http://www.reproductivefacts.org/globalassets/rf/news-and-publications/bookletsfact-sheets/english-fact-sheets-and-info-booklets/booklet_medications_for_inducing_ovulation.pdf
  2. Rienzi L., Vajta G., Ubaldi F. Predictive value of oocyte morphology in human IVF: a systematic review of the literature. Human Reprod Update 2011; 17: 1: 34–45.
  3. Christiane Wittemer, Jeanine Ohl, Karima Bettahar-Lebugle, Stéphane Viville, Israel Nisand. A quantitative and morphological analysis of oocytes collected during 438 IVF cycles. Journal of Assisted Reproduction and Genetics 17 (1), 44-50, 2000. – Режим доступу: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3455195/pdf/10815_2004_Article_221175.pdf
  4. S. S. Vasan. Semen analysis and sperm function tests: How much to test? Indian Journal of Urology: IJU: Journal of Urological Society of India. 2011 Jan-Mar; 27(1): 41–48. – Режим доступу:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3114587/
  5. Lamb DJ. Semen analysis in 21st century medicine: the need for sperm function testing. Asian J Androl. 2010; 12:64–70. – Режим доступу:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3739671/?report=reader
  6. Menkveld R, Stander FS, Kotze TJ, Kruger TF, van Zyl JA. The evaluation of morphological characteristics of human spermatozoa according to stricter criteria. Hum Reprod. 1990; 5:586–92. – Режим доступу:https://academic.oup.com/humrep/article-abstract/5/5/586/598899?redirectedFrom=fulltext
    1. Aitken RJ, Sutton M, Warner P, Richardson DW. Relationship between the movement characteristics of human spermatozoa and their ability to penetrate cervical mucus and zona-free hamster oocytes. J Reprod Fertil. 1985; 73:441–9. – Режим доступу:https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/3989795/
    2. Bachtell NE, Conaghan J, Turek PJ. The relative viability of human spermatozoa from the vas deferens, epididymis and testis before and after cryopreservation. Hum Reprod. 1999; 14:3048–51. – Режим доступу:https://academic.oup.com/humrep/article/14/12/3048/2913085
    3. Evenson DP, Jost LK, Marshall D, Zinaman MJ, Clegg E, Purvis K, et al. Utility of the sperm chromatin structure assay as a diagnostic and prognostic tool in the human fertility clinic. Hum Reprod. 1999; 14:1039–49. – Режим доступу: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10221239/

Вам буде цікаво дізнатись: